Die RNAi Technologie bietet einen vielversprechenden Ansatz zur Behandlung von hepatischen Viruserkrankungen. Um einen sicheren Einsatz von siRNAs gewährleisten zu können, ist es notwendig, die hepatischen Wirkmechanismen von siRNA zu kennen. Im ersten Teil dieser Arbeit wurde die Beteiligung von endosomalen-MyD88-abhängigen Toll-like Rezeptoren an der siRNA-vermittelten Immunantwort in vivo nachgewiesen. Diese Immunantwort wurde durch die nicht-parenchymalen Leberzellen vermittelt und resultierte in der Expression verschiedener Zytokine. Auch in weiteren Organen wie Milz, Niere und Herz war eine Immunreaktion detektierbar. Durch chemische Modifikationen am Riboserückgrat der siRNA wie 2’O-Methyl oder 2’Fluor konnte diese immunologische Nebenwirkung unterbunden werden. Des Weiteren konnte im zweiten Abschnitt mittels der Isg15-siRNA gezeigt werden, dass der Einsatz von LNP01-formulierten siRNAs im Mausmodell zu einem Hepatozyten-spezifischen Knockdown führte. Die verschiedenen Ribose-Modifikationen hatten hierbei keinen signifikanten Einfluss auf die Effizienz der siRNAs. Zusätzlich konnte gezeigt werden, dass die LNP01-Formulierung auch in einem humanisierten Mausmodell zur spezifischen Gensuppression in den humanen Hepatozyten führte, sowie zur Suppression der HCV-Replikation in vivo. Der etablierte, siRNA-vermittelte Knockdown des Wirtsfaktors Isg15 in vivo, ist eine Option in der HCV Therapie, da er die HCV-Replikation direkt supprimiert und zusätzlich zu einer verstärkten hepatischen Reaktion auf endogenes und exogenes Interferon alpha führte. In vitro zeigte sich die Kombination aus siISG15 und einem Protease-Inhibitor (PI) als effiziente Therapieoption in der HCV Behandlung, mit dem Vorteil, dass die Entstehung von Resistenzen gegenüber des PIs den Therapieerfolg weniger beeinflusst. Der dritte Teil dieser Arbeit nutzte den Isg15 Knockdown in vivo sowie in vitro im HCV-Replikon Modell, um die Bedeutung von Isg15 im Rahmen der HCV-Replikation aufzuklären. Die Proteomanalyse identifizierte verschiedene Proteine, welche von der Isg15 Expression abhängig waren, welche einen direkten Effekt auf die HCV-Replikation hatten (Hnrnp K und Hmgcs1) oder in den Lipid-Metabolismus und in den Zusammenbau der Viruspartikel (assembly) involviert waren. Psma6 wurde als negativ Regulator der Isg15 Expression identifiziert und scheint damit indirekt die HCV-Replikation zu beeinflussen. Die Anwendung von siRNA im HBV transgenen Mausmodell im letzten Abschnitt dieser Arbeit zeigte zum einen, dass siRNAs effiziente Werkzeuge sind, um die virale Replikation auch direkt zu hemmen. Zum anderen diente der Einsatz der siRNA der Untersuchung der HBV-induzierten Immunantwort. Es zeigte sich, dass in den HBVtg Tieren ohne HBsAg Expression eine konsistente TLR3-induzierte IFN/ISG Antwort vorlag. Auch die Expression von pro-viralen Wirtsfaktoren wie Hnrnp K und Hmgcs1 war erhöht. Die Tiere wiesen ein funktionelles TLR-System auf, jedoch war die TLR3- und TLR7-abhängige Immunantwort in den Tieren reduziert, aber nicht komplett inhibiert. Diese Arbeit zeigt das Anwendungsspektrum von siRNAs in vivo, sie können der Untersuchung von Virus-Wirts-Interaktionen, ebenso wie der therapeutischen Anwendung gegen virale Hepatitiden, dienen.