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Discovery and Engineering of Promiscuous Acyltransferases

  • Promiscuous acyltransferases enable transesterification reactions in bulk water by preferentially catalyzing acyl transfer over hydrolysis. Until recently, only a small number of promiscuous acyltransferases have been described in the literature, exhibiting several limitations in terms of acyltransferase efficiency and applicability. This work focuses on the discovery of novel promiscuous acyltransferases and the engineering of promiscuous acyltransferases via rational design. Several promiscuous acyltransferases in the bacterial hormone-sensitive lipase family and family VIII carboxylesterases have been identified, demonstrating that promiscuous acyltransferase activity is not a rare phenomenon. Moreover, the efficiency and applicability of the enzymes could be improved via protein engineering in terms of acyltransferase activity, enantioselectivity, and substrate scope.
  • Promiskuitive Acyltransferasen ermöglichen Transesterifizierungsreaktionen in wässrigen Systemen durch die bevorzugte Katalyse von Acyltransfer anstelle von Hydrolyse. Vor Beginn dieser Studie waren nur wenige promiskuitive Acyltransferasen literaturbeschrieben, welche zudem viele Limitationen in der Acyltransferasespezifität und Anwendbarkeit aufweisen. In dieser Arbeit wurden neue promiskuitive Acyltransferasen identifiziert und darüber hinaus promiskuitive Acyltransferasen durch rationales Design optimiert. Durch die Entdeckung mehrerer promiskuitiver Acyltransferasen in der Familie der bakteriellen hormonsensitiven Lipasen und unter den Familie VIII Carboxylesterasen konnte gezeigt werden, dass promiskuitive Acyltransferaseaktivität bei Hydrolasen kein seltenes Phänomen ist. Des Weiteren konnten die Effizienz und Anwendbarkeit der Enzyme im Hinblick auf Acyltransferaseaktivität, Enantioselektivität und erweiterte Substratspektren mittels Protein Engineering verbessert werden.

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Metadaten
Author: Simon Peter Godehard
URN:urn:nbn:de:gbv:9-opus-45202
Title Additional (German):Entdeckung und Engineering promiskuitiver Acyltransferasen
Referee:Prof. Dr. Uwe T. Bornscheuer, Prof. Dr. Magali Remaud-Simeon, Prof. Dr. Anne S. Meyer
Advisor:Prof. Dr. Uwe T. Bornscheuer
Document Type:Doctoral Thesis
Language:English
Year of Completion:2021
Date of first Publication:2021/04/26
Granting Institution:Universität Greifswald, Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät
Date of final exam:2021/04/15
Release Date:2021/04/26
Tag:Acyltransferase; Enzyme Discovery; Protein Engineering
GND Keyword:Biokatalyse, Proteindesign
Page Number:193
Faculties:Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät / Institut für Chemie und Biochemie
DDC class:500 Naturwissenschaften und Mathematik / 500 Naturwissenschaften