| Lizenz: Veröffentlichungsvertrag für Publikationen ohne Print on Demand (2MB) |
- URN zum Zitieren dieses Dokuments:
- urn:nbn:de:bvb:355-epub-185403
- DOI zum Zitieren dieses Dokuments:
- 10.5283/epub.18540
| Dokumentenart: | Hochschulschrift der Universität Regensburg (Dissertation) |
|---|---|
| Open Access Art: | Primärpublikation |
| Datum: | 17 Dezember 2010 |
| Begutachter (Erstgutachter): | Prof. Dr. Michael Melter und Prof. Dr. Bernhard Banas |
| Tag der Prüfung: | 2 November 2010 |
| Institutionen: | Medizin > Lehrstuhl für Kinder- und Jugendmedizin |
| Themenverbund: | Nicht ausgewählt |
| Stichwörter / Keywords: | Liver transplantation, Real-Time-RT-PCR, IP10, MIG, CXCR3, acute Rejection, Chemokines, Gene expression, ischemia-reperfusion-injury, GAPDH |
| Dewey-Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften > 610 Medizin |
| Status: | Veröffentlicht |
| Begutachtet: | Ja, diese Version wurde begutachtet |
| An der Universität Regensburg entstanden: | Zum Teil |
| Dokumenten-ID: | 18540 |
Zusammenfassung (Deutsch)
Die fast ausschließliche Expression des Chemokinrezeptors CXCR3 auf TH1-Helferzellen legt eine Funktion dieses Rezeptors und seiner Liganden IP10 (CXCL10) und MIG (CXCL9) auch innerhalb von Abstoßungsreaktionen nach Organtransplantation nahe. Dies konnte in tierexperimentellen und klinischen Untersuchungen bestätigt werden. Die Ziele dieser Arbeit sind, die Real-Time-Taqman-PCR aus humanen ...
Zusammenfassung (Deutsch)
Die fast ausschließliche Expression des Chemokinrezeptors CXCR3 auf TH1-Helferzellen legt eine Funktion dieses Rezeptors und seiner Liganden IP10 (CXCL10) und MIG (CXCL9) auch innerhalb von Abstoßungsreaktionen nach Organtransplantation nahe. Dies konnte in tierexperimentellen und klinischen Untersuchungen bestätigt werden.
Die Ziele dieser Arbeit sind, die Real-Time-Taqman-PCR aus humanen Leberbiopsien als Methode zur quantitativen Bestimmung der Chemokinexpression nach und während orthotoper Lebertransplantation (OLT)zu etablieren. Des Weiteren soll die Studie prüfen, ob eine akute zelluläre Abstoßung (AR), der Ischiämie-Reperfusionsschaden (IRI) und die Organqualität mit einer vermehrten Genexpression von IP10, MIG und CXCR3 im Zusammenhang stehen.
Die Genexpression wurde mittels PCR in Spenderleberproben von 21 Patienten (52,4% weiblich, 47,6% männlich, mittleres Alter zum Zeitpunkt der OLT 44 Jahre) unmittelbar vor Implantation, in der ersten Stunde nach Reperfusion und 10-18 Tage nach OLT gemessen und mit GAPDH als Housekeepinggen einer effizienzkorrigierten, semiquantitativen Auswertung zugeführt. Der klinische Verlauf der Patienten wurde über 24 Monate nach OLT beobachtet.
Die gemessenen Genexpressionen sind reproduzierbar und korrelieren hoch signifikant miteinander. Die Gruppe der Patienten, die in den ersten 24 Monaten nach OLT mehr als eine Abstoßung entwickelt hat, hat vor Implantation in der Spenderleber signifikant höhere Genexpressionen für IP10 (p= 0,014), MIG (p= 0,014) und CXCR3 (p= 0,044), als Patienten, die höchstens eine Abstoßung entwickelt haben. Kurz nach Reperfusion ist die Genexpression von CXCR3 in der abstoßungsfreien Patientengruppe und in der Patientengruppe mit einer höchstens leichten Abstoßung signifikant (p= 0,047 bzw. 0,008) niedriger als in der Patentengruppe mit Abstoßung bzw. mindestens mäßiger Abstoßung. Für IP10 findet sich diese Signifikanz (p= 0,033) nur für den Vergleich höchstens leichte gegen mindestens mäßige Abstoßung. Für CXCR3 findet sich auch eine signifikante (p= 0,047) Zunahme der Genexpression mit Zunahme der kalten Ischiämiezeit (CIT). 10-18 Tage postoperativ ist die Genexpression von IP10, MIG und CXCR3 ein häufiges Ereignis und nicht signifikant mit Abstoßungsgeschehen assoziiert.
Anhand der oben genannten Reproduzierbarkeit und Korrelation der Genexpressionen ist anzunehmen, dass die durchgeführte Methode geeignet ist. Die Genexpression vor Implantation spiegelt bisher nicht verifizierbare immunologische Reaktionen im Spenderorgan auf zellulärer Ebene wider, die eventuell ein immunologisches Milieu schaffen, welches wahrscheinlich den weitern klinischen Verlauf, insbesondere bezogen auf AR wesentlich beeinflussen kann. Somit können sie sowohl einen Marker für Organqualität auf zellulärer Ebene darstellen, als auch einen frühen Indikator für ein hohes Abstoßungsrisiko. Es ist anzunehmen, dass die intraoperative Expression von IP10 und CXCR3 durch den IRI bedingt ist. Aufgrund des oben genannten Zusammenhangs zwischen AR und der Expression von IP10 und CXCR3 zu diesem Zeitpunkt, kann man davon ausgehen, dass der IRI mit vermehrter Genexpression von IP10 und CXCR3 zu späteren AR prädisponiert und eine pharmakologische Intervention hier eventuell spätere Abstoßungen verhindern kann. Auch hier scheint die Genexpression von IP10 und CXCR3 prädiktiv für das Abstoßungsrisiko im weiteren Verlauf zu sein. Die Genexpression von IP10, MIG und CXCR3 10-18 Tage nach OLT scheint kein guter Marker für die Diagnose und Beurteilung einer Abstoßung zu sein.
Übersetzung der Zusammenfassung (Englisch)
The almost exclusive expression of chemokinreceptor CXCR3 on TH1 Cells suggests an important role for the receptor and it´s ligands MIG and IP10 in acute cellular rejections (AR) after orthotopic liver transplantation (OLT). This was confirmed in various animal studies and in preliminary clinical trials. The aims of the study were to establish the Real Time Taqman RT-PCR from human liver ...
Übersetzung der Zusammenfassung (Englisch)
The almost exclusive expression of chemokinreceptor CXCR3 on TH1 Cells suggests an important role for the receptor and it´s ligands MIG and IP10 in acute cellular rejections (AR) after orthotopic liver transplantation (OLT). This was confirmed in various animal studies and in preliminary clinical trials.
The aims of the study were to establish the Real Time Taqman RT-PCR from human liver biopsies as method for measuring the chemokinexpression during and after OLT. We also wanted to investigate if the expression of IP10, MIG and CXCR3 is associated with acute cellular rejections (AR), organ quality and ischemia-reperfusion-injury (IRI).
The gene expression of the chemokines IP10 (CXCL10), MIG (CXCL9) and their receptor CXCR3 was analyzed during and after orthotopic liver transplantation (OLT) in 21 patients (median age 44 years, 52,4% female) with Real-Time-RT-Taqman PCR. The PCR was performed on specimens from donor liver immediately before implantation, in the first hour after reperfusion and 10-18 days after OLT. The results were analyzed via efficiency-rectified semiquantitative analysis with GAPDH as Housekeepinggene. The clinical outcome of the patients was observed 24 months after OLT and was correlated to the chemokinexpression of the peritransplant period.
The results show reproducible gene expressions of CXCR, IP10 and MIG. The group of patients, who have had more than one AR in the first 24 month after OLT, have significantly higher gene expressions of IP10 (p= 0,014), MIG (p= 0,014) and CXCR3 (p= 0,044), than the patients, who have had only one or none AR. The gene expression of CXCR3 and IP10 after reperfusion is in patients, who have had at most a slight AR, significantly (p=0,008 and 0,033) lower than in patients, who have had AR with higher severity. Also patients, who have had no AR, have a significantly (0,047) lower gene expression of CXCR3, than patients with AR. The results also reveal a significant association of CXCR3 and cold ischemic time. 10-18 days after OLT the gene expression of IP10, MIG und CXCR is ubiquitous and not significantly associated with AR.
We established the described method for quantifying the gene expression of the chemokines IP10, MIG and their receptor CXCR3. The pattern of gene expression before implantation suggests that the expression of IP10 and CXCR3 demonstrates that immunological setting in the donor liver, which can have influence on the clinical outcome. That means, that gene expression of IP10 and CXCR3 is a potential reasonable marker for donor-organ-quality on cellular level and an early marker for high risk for AR. The expression of IP10 and CXCR3 after reperfusion is presumably caused by the IRI. This shows the importance of IP10 and CXCR3 in the IRI and demonstrates the association between IRI and AR later. A pharmacological intervention via IP10, MIG or CXCR3 at this time may prevent later AR. Further the gene expression at this time is a potential marker to identify patients with high risk for AR later. The gene expression 10-18 days after OLT seems not to be a good marker to demonstrate or evaluate an AR.
Metadaten zuletzt geändert: 26 Nov 2020 07:58
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