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ZeBRα a universal, multi-fragment DNA-assembly-system with minimal hands-on time requirement

DOI zum Zitieren der Version auf EPub Bayreuth: https://doi.org/10.15495/EPub_UBT_00004650
URN zum Zitieren der Version auf EPub Bayreuth: urn:nbn:de:bvb:703-epub-4650-2

Titelangaben

Richter, David ; Bayer, Katharina ; Toesko, Thomas ; Schuster, Stefan:
ZeBRα a universal, multi-fragment DNA-assembly-system with minimal hands-on time requirement.
In: Scientific Reports. Bd. 9 (27 Februar 2019) Heft 1 .
ISSN 2045-2322
DOI der Verlagsversion: https://doi.org/10.1038/s41598-019-39768-0

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Abstract

The recently evolved field of synthetic biology has revolutionized the way we think of biology as an “engineerable” discipline. The newly sprouted branch is constantly in need of simple, cost-effective and automatable DNA-assembly methods. We have developed a reliable DNA-assembly system, ZeBRα (Zero-Background Redα), for cloning multiple DNA-fragments seamlessly with very high efficiency. The hallmarks of ZeBRα are the greatly reduced hands-on time and costs and yet excellent efficiency and flexibility. ZeBRα combines a “zero-background vector” with a highly efficient in vitro recombination method. The suicide-gene in the vector acts as placeholder, and is replaced by the fragments-of-interest, ensuring the exclusive survival of the successful recombinants. Thereby the background from uncut or re-ligated vector is absent and screening for recombinant colonies is unnecessary. Multiple fragments-of-interest can be assembled into the empty vector by a recombinogenic E. coli-lysate (SLiCE) with a total time requirement of less than 48 h. We have significantly simplified the preparation of the high recombination-competent E. coli-lysate compared to the original protocol. ZeBRα is the least labor intensive among comparable state-of-the-art assembly/cloning methods without a trade-off in efficiency.

Weitere Angaben

Publikationsform: Artikel in einer Zeitschrift
Themengebiete aus DDC: 500 Naturwissenschaften und Mathematik
Institutionen der Universität: Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Biologie > Lehrstuhl Tierphysiologie > Lehrstuhl Tierphysiologie - Univ.-Prof. Dr. Stefan Schuster
Fakultäten
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Biologie
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Biologie > Lehrstuhl Tierphysiologie
Sprache: Englisch
Titel an der UBT entstanden: Ja
URN: urn:nbn:de:bvb:703-epub-4650-2
Eingestellt am: 27 Mrz 2020 11:14
Letzte Änderung: 27 Mrz 2020 11:14
URI: https://epub.uni-bayreuth.de/id/eprint/4650

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